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小鼠钙卫蛋白(CALP)酶联免疫吸附测定试剂盒品牌-Chemstan—钙卫蛋白标本要求:Chemstan推出小鼠CALP酶联免疫吸附测定试剂盒

时间:2023-10-31 09:53:41 点击:188 次

介绍

小鼠钙卫蛋白(CALP)酶联免疫吸附测定试剂盒是一种用于检测小鼠CALP水平的试剂盒。CALP是一种钙调蛋白酶,参与多种细胞信号转导和生物学过程,如细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期调控等。CALP在许多疾病的发生和发展中起着重要作用。该试剂盒可用于小鼠血清、血浆、组织和细胞培养上清等样本的检测,具有高灵敏度、高特异性和高重复性。

原理

该试剂盒采用酶联免疫吸附法(ELISA)原理,利用特异性抗体对小鼠CALP进行定量检测。在试剂盒提供的96孔板上吸附CALP单克隆抗体。然后,加入标准品或待测样本,样本中的CALP与抗体结合形成免疫复合物。接着,加入生物素化的CALP检测抗体,该抗体与免疫复合物结合。再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,该亲和素与生物素结合,形成HRP-亲和素-生物素-检测抗体-免疫复合物。加入底物TMB,HRP催化TMB生成蓝色产物,反应终止后加入硫酸,使产物转变为黄色。通过比色法测定样品中CALP的浓度。

试剂盒组成

该试剂盒包括96孔板、标准品、CALP单克隆抗体、CALP检测抗体、HRP-亲和素、TMB底物、反应终止液等。其中,标准品用于建立标准曲线,CALP单克隆抗体和CALP检测抗体分别用于捕获和检测CALP,HRP-亲和素用于放大信号,TMB底物用于产生信号,反应终止液用于终止反应。

操作步骤

1. 取出所需的96孔板,标准品和样本,将标准品和样本分别加入孔中,和记怡情慱娱和记每孔加100μl。

2. 加入100μl稀释后的CALP单克隆抗体,混匀后孵育1小时。

3. 弃去孔中液体,用洗涤缓冲液洗板3次。

4. 加入100μl稀释后的CALP检测抗体,混匀后孵育1小时。

5. 弃去孔中液体,用洗涤缓冲液洗板3次。

6. 加入100μl稀释后的HRP-亲和素,混匀后孵育30分钟。

7. 弃去孔中液体,用洗涤缓冲液洗板3次。

8. 加入100μl TMB底物,孵育15分钟。

9. 加入50μl反应终止液,停止反应。

10. 使用酶标仪测定吸光度值,计算样品中CALP的浓度。

注意事项

1. 标准品和待测样本应该按照试剂盒说明书中的要求进行处理和稀释。

2. 洗涤孔板时,应该使用洗涤缓冲液,避免洗涤液残留。

3. 操作过程中,应该避免试剂污染和交叉污染。

4. 试剂盒应该保存在2-8℃干燥、避光、避冻的环境中。

结果解读

通过测定吸光度值,可以得到样品中CALP的浓度。标准曲线的斜率和截距可以用来计算样品中CALP的浓度。如果样品中CALP的浓度超过标准曲线的最高浓度,需要进行适当的稀释。应该注意负对照和阳性对照的结果,以判断实验结果的可靠性。如果样品中CALP的浓度高于阳性对照的浓度,说明样品中CALP的水平较高。反之,如果样品中CALP的浓度低于负对照的浓度,说明样品中CALP的水平较低。

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